于佳1，裴秀英1，杨延周1，常青1，马会明1，马文智1，蒲静1，孙苗1，谢人明3，王燕蓉1。
1.宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室，2.西北大学药学院，
【摘要】 目的：研究不同剂量妇科养荣胶囊改善烷化剂所致小鼠卵巢功能减退的效果及相关机制。方法：6-7周龄C57雌性小鼠一次性腹腔注射120mg/kg 环磷酰胺和10mg/kg白消安制作卵巢损伤模型，正常对照组注射同容量的溶剂DMSO。GnRHa阳性干预组于造模前7天给予曲谱瑞林38mg/kg一次性皮下注射（GnRHa组）、妇科养荣胶囊高、中、低浓度干预组于造模前7天至造模后8周持续灌胃（6g/kg/d、4g/kg/d和2g/kg/d），卵巢损伤模型组给予生理盐水0.2ml/d灌胃。于处理后3天、4周和8周取材，检测血清E2、FSH、INHB和AMH水平；卵巢石蜡切片计数各组卵泡数量；免疫组织化学技术与Western-Blot检测4周及8周FOXL2和AMH。同时，造模8周后，雌鼠与有生育能力的雄鼠合笼4个情期，观察各组妊娠率和产仔数。结果：各干预组卵泡数与卵巢损伤组没有明显差异，但明显低于对照组；高浓度组与GnRHa组8周的窦前卵泡与窦卵泡数与对照组间无显著性差异。各组血清E2低于正常对照组，FSH水平组间相似。4周及8周FOXL2和AMH蛋白表达为卵巢损伤模型组明显低于正常对照组（P＜0.05）。妇科养荣胶囊高、中浓度组显著高于损伤模型对照组（P＜0.05）。妊娠率在正常对照组、GnRHa组及妇科养荣胶囊高、中、低浓度组分别为（66.67%、50.00%、80.00%、60.00%和46.67%），高浓度组明显高于单纯卵巢损伤模型组36.36%（P＜0.05）。结论：妇科养荣胶囊高浓度干预组可明显提高烷化剂所致卵巢损伤小鼠的妊娠率，其机制可能与上调相关卵泡颗粒细胞表达FOXL2和AMH有关。
关键词 妇科养荣胶囊；卵巢损伤；烷化剂；FOXL2；AMH；生育检测
王燕蓉教授简介
王燕蓉，女，1957年生，毕业于北京医科大学，获医学硕士学位。现为组织胚胎学教授、硕士研究生导师，山东大学联合博士研究生导师，宁夏回族自治区首批313人才，享受国务院特殊津贴及自治区政府特殊津贴，自治区教学名师。现任宁夏生殖与遗传重点实验室主任。担任中国解剖学会理事、中国细胞生物学会医学细胞生物学会常务理事，中国动物学会生殖生物学会理事，宁夏解剖学会副理事长，宁夏医学会生殖医学分会副主任委员。
长期从事生育力体外保存技术的基础研究，在人精液保存、动物胚胎、卵巢和人脐血干细胞的玻璃化冻存研究中，系统研究了慢速程序化冻存方法、超速冻存方法、玻璃化冻存方法的冻存效果。主持过国家自然科学基金课题4项，国家外专局课题1项，国家教育部骨干教师资助项目1项，宁夏攻关课题2项及多项宁夏自然科学基金、厅级项目多项。主编了我国第一部《女性生育力体外保存技术》专著。发表论文40多篇，SCI收录5篇。获得宁夏回族自治区科技成果二、三等奖6项，自治区自然科学优秀论文一、二、三等奖多项。
卵巢形态学观察（下图）
造模3天凋亡相关蛋白免疫组化结果（下图）
编者语：
随着社会、经济环境的变迁，城市生活节奏的改变，育龄期女性的生育观念已悄然出现了变化，晚育、少育渐渐成为主流，但同时不孕症的阴影也逐渐侵蚀着育龄期女性的生殖健康。据相关资料统计，不孕症发病率占育龄期女性的8~17%，平均10%左右，已经成为育龄期妇女的一种常见病，而不孕症又会对家庭生活引发一系列的连锁反应，甚至导致家庭的解体。
环境污染、不良的生活方式都成为不孕症发病率上升的助力，而育龄期女性卵巢功能的下降则是引发不孕症的重要原因之一。妇科养荣胶囊作为妇科调理气血的名方，长年应用于育龄期女性月经相关疾病和不孕症的治疗，并取得了满意的疗效。然而，妇科养荣胶囊治疗不孕症的机理仍不明确，为探明相关机理，更好地服务于临床医生和不孕症患者，安得药业与宁夏医科大学教育部生育力保持中心实验室、西北大学药学院生物医药中心实验室合作开展了妇科养荣胶囊改善卵巢功能的相关研究，历时三年，投入近百万资金后，终于取得了重要的研究成果。
就不孕症药物研究而言，其疗效判定的终极指标就是妊娠率，而这项研究中妇科养荣胶囊高剂量组的妊娠率（80%）远高于模型组（36.6%），明显高于西药对照组（50%），甚至高于正常对照组（66.7%），这充分说明了妇科养荣胶囊在不孕症治疗上的确切疗效。这一结果与前期妇科养荣胶囊在不孕症方面的临床研究（《妇科养荣胶囊在卵巢储备功能减退者助孕治疗中的临床观察》、《 妇科养荣胶囊联合心理治疗内分泌失调性不孕症56例》）结果是一致的。
但妇科养荣胶囊治疗不孕症的机理何在呢？为了回答这个问题，这项研究观察了受试动物卵巢细胞的变化，发现经过高浓度妇科养荣胶囊治疗8周后窦卵泡、窦前卵泡均已恢复至正常水平（与正常对照组无显著差异）。而对AMH、FOXL2的观察，则说明妇科养荣胶囊能明显改善受试动物的卵巢储备功能和对卵泡生长、成熟过程的调控（与卵巢损伤组有显著性差异）。就目前研究的结果看，妇科养荣胶囊治疗不孕症的机理，可能与改善卵泡发育微环境，保护卵泡发育中起关键作用的颗粒细胞，提高卵巢储备功能有关。
这项基础研究是妇科养荣胶囊治疗不孕症系列研究的组成部分，它既是在实验动物层面对前期临床研究结果的印证，也是对临床研究中妇科养荣胶囊改善卵巢功能机理研究的补充。
《妇科养荣胶囊改善烷化剂所致小鼠卵巢功能减退的效果及相关机制研究》是安得药业在产品再研究方面持续努力的结果，它在一定程度上阐明了妇科养荣胶囊治疗不孕症的机制，使临床医生更好地使用妇科养荣胶囊，服务于广大不孕症患者成为可能。